Elabscience MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性檢測。那么你知道Elabscience MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒該怎么用嗎?讓我們一起來看看吧!
1. 準備工作
本試劑盒中 MTT (5×)為濃縮液,實驗前稀釋成 1×工作液。例如:取 100 μL MTT (5×),加入 400 μL
MTT Diluent Buffer,混勻后即為1×MTT 工作液。
2. 取生長狀態(tài)良好的細胞,調(diào)整細胞密度,按每孔100 μL 細胞懸液接種于96 孔板中,同時設(shè)空白孔(不加細胞但是加入同體積的培養(yǎng)基)。
注:通常細胞增殖實驗每孔加入100 μL約含2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100 μL約含5000個細胞(具體每孔所用的細胞的數(shù)目,需根據(jù)細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。
3. 根據(jù)實驗設(shè)計對細胞進行培養(yǎng)和處理。
4. 每孔加入 50 μL 的 1×MTT 工作液。繼續(xù)孵育 1~4 h,使 MTT 還原為甲臜。
注:MTT孵育條件與細胞培養(yǎng)條件相同。
5. 小心吸出上清液,每孔加入 150 μL 的 DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
6. 用酶標儀測定在 570 nm 處的吸光度。
7. 結(jié)果計算
[注]:
ODsample: 實驗孔的OD值
ODcontrol: 對照孔的OD值
ODblank: 空白孔的OD值
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